Plasmide Double Nickase (h) FOXP2: sc-417494-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXP2 Double Nickase (h) et le plasmide FOXP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FOXP2 Antibody (5C11A8): sc-517261
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXP2 | sc-417494-NIC | 20 µg | $410.00 |
FOXP2 code un facteur de transcription de la famille forkhead box qui régule des programmes d’expression génique nécessaires au neurodéveloppement, à la différenciation neuronale et à la formation des circuits. Dans le noyau, FOXP2 se fixe à des motifs spécifiques de l’ADN et coordonne des réseaux transcriptionnels impliqués dans la plasticité synaptique, la croissance des neurites et la signalisation dépendante de l’activité, en s’articulant avec des voies qui façonnent le développement du cortex et des ganglions de la base. Des altérations de la dose ou de la séquence de FOXP2 sont associées à des troubles de la parole et du langage, ainsi qu’à des phénotypes neurodéveloppementaux plus larges, ce qui en fait un nœud clé pour étudier le contrôle transcriptionnel des circuits neuronaux liés à la communication. FOXP2 est également étudié dans des modèles de maturation neuronale et de spécification des types cellulaires afin de cartographier les cibles en aval et l’architecture régulatrice.
FOXP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.