FOXL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403351

Visão geral

FOXL2 é um fator de transcrição da família forkhead box que desempenha um papel central na diferenciação de células da granulosa, na foliculogênese ovariana e na manutenção da identidade ovariana. Ao se ligar a elementos cis-regulatórios e coordenar programas transcricionais associados à cromatina, o FOXL2 integra sinais que modulam a esteroidogênese, o controle do ciclo celular e a apoptose em tecidos reprodutivos. A desregulação da atividade de FOXL2 perturba redes gênicas do desenvolvimento e está fortemente associada a distúrbios do desenvolvimento sexual e à patobiologia ovariana, incluindo alterações somáticas recorrentes observadas em tumores de células da granulosa do tipo adulto. Como regulador nuclear com funções definidoras de linhagem, o FOXL2 é amplamente estudado em vias que governam a endocrinologia reprodutiva, a regulação transcricional e a biologia tumoral específica de tecidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FOXL2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FOXL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FOXL2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FOXL2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FOXL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FOXL2 para a investigação da sinalização de FOXL2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FOXL2 críticos para a função FOXL2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FOXL2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FOXL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FOXL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FOXL2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FOXL2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FOXL2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FOXL2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FOXL2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.