Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) FMR1: sc-401919-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FMR1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FMR1 Double Nickase (h) et le plasmide FMR1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FMR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FMR1 Antibody (148.1): sc-101048
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FMR1 | sc-401919-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FMR1 | sc-401919-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FMR1 code la protéine du retard mental de l’X fragile (FMRP), une protéine se liant à l’ARN qui régule le transport, la stabilité et la traduction des ARNm, en particulier au niveau des synapses neuronales. FMRP s’associe aux polyribosomes et aux granules ribonucléoprotéiques afin de moduler la synthèse locale de protéines dépendante de l’activité, soutenant le développement synaptique, la plasticité et la maturation des épines dendritiques. En contrôlant des programmes de traduction liés à la signalisation, FMR1 s’inscrit au carrefour de voies impliquées dans la fonction synaptique et la différenciation neuronale. La perte ou la dérégulation de l’expression de FMR1 est fortement associée aux phénotypes neurodéveloppementaux liés à l’X fragile, ce qui en fait une cible majeure pour des études mécanistiques du métabolisme de l’ARN et de la biologie synaptique.
FMR1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FMR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FMR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FMR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FMR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.