FLRT3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406632

Descripción general

FLRT3 (proteína transmembrana 3 rica en leucina y fibronectina) codifica una proteína de membrana de paso único que actúa como señal de adhesión celular y de guía durante el desarrollo, coordinando las interacciones célula–célula y el crecimiento de neuritas. FLRT3 participa en redes de señalización que involucran vías del receptor de FGF y ligandos extracelulares de guía como los receptores UNC5, lo que influye en la adhesión, la repulsión y el patrón de los tejidos. A través de estas interacciones, FLRT3 contribuye a la regulación de la migración celular, la formación de sinapsis y la morfogénesis en múltiples contextos tisulares. Se han descrito alteraciones en la expresión de FLRT3 y en la conectividad de sus vías en estudios sobre procesos del neurodesarrollo y biología del cáncer, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la investigación de adhesión y migración.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FLRT3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FLRT3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FLRT3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FLRT3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FLRT3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FLRT3 para la investigación de la señalización de FLRT3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FLRT3 críticos para la función de FLRT3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FLRT3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FLRT3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FLRT3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FLRT3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FLRT3 (h) y el plásmido HDR FLRT3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FLRT3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FLRT3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.