Plásmido Doble Nickase (h) FLAP: sc-402268-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FLAP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FLAP (h) y el plásmido de doble nickasa FLAP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ALOX5AP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FLAP | sc-402268-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FLAP | sc-402268-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **ALOX5AP** codifica la proteína activadora de la 5‑lipooxigenasa (**FLAP**), una proteína integral de la membrana nuclear que facilita la entrega de ácido araquidónico a la 5‑lipooxigenasa para sostener la biosíntesis de leucotrienos. FLAP actúa dentro de la red de metabolismo de eicosanoides, dando forma a los perfiles de mediadores lipídicos que influyen en la quimiotaxis de los leucocitos, el tono vascular y la señalización inflamatoria. Mediante la regulación de la producción de leucotrienos, **ALOX5AP** vincula la activación de la inmunidad innata con vías posteriores impulsadas por GPCR y citocinas que modulan el reclutamiento celular y las respuestas tisulares. Se ha asociado la actividad o expresión alterada de FLAP con fenotipos inflamatorios desregulados y con contextos de enfermedad cardiometabólica y neuroinflamatoria, lo que la convierte en una diana relevante para estudios mecanísticos en modelos celulares mieloides y vasculares.
FLAP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ALOX5AP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ALOX5AP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ALOX5AP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ALOX5AP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.