Fibromodulin Lentiviral Activation Particles (h): sc-401610-LAC

FMOD kodiert Fibromodulin, ein kleines leucinreiches Proteoglykan, das in die extrazelluläre Matrix sezerniert wird, wo es an Kollagene bindet und die Fibrillogenese, den Aufbau der Matrix sowie die Gewebemechanik reguliert. Fibromodulin moduliert die Signalübertragung über Wachstumsfaktorwege, einschließlich Signalen der TGF-β-Familie, und beeinflusst dadurch Programme der Zelladhäsion, Migration und Differenzierung, die für die Homöostase des Bindegewebes relevant sind. Eine veränderte FMOD-Expression oder eine abweichende Matrixlokalisation wurde mit Umbau-Phänotypen in Verbindung gebracht, wie sie bei Fibrose, Osteoarthritis und im tumorassoziierten Stroma beobachtet werden, was FMOD zu einem hilfreichen Ansatzpunkt für die Untersuchung von durch die extrazelluläre Matrix gesteuertem Zellverhalten macht. Als Matrixbestandteil mit regulatorischen Interaktionen wird Fibromodulin häufig in Modellen der Wundheilung, Angiogenese und Mechanotransduktion untersucht.

Fibromodulin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FMOD-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Fibromodulin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FMOD-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Fibromodulin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FMOD-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.