Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) FAT10: sc-402682-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FAT10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FAT10 Double Nickase (h) et le plasmide FAT10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UBD. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FAT10 Antibody (A-8): sc-393630
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FAT10 | sc-402682-NIC | 20 µg | $410.00 |
UBD code pour FAT10 (également appelé ubiquitine D), un modificateur de type ubiquitine rapidement induit par des cytokines pro-inflammatoires et conjugué à des protéines substrats afin d’orienter leur dégradation par le protéasome 26S. FAT10 participe à la régulation de l’immunoprotéasome, au traitement des antigènes et à la protéostasie en réponse au stress, en interagissant avec la signalisation NF-κB et d’autres voies associées à l’inflammation. Une expression altérée de UBD/FAT10 a été rapportée dans des contextes d’inflammation chronique et de renouvellement protéique dérégulé, ce qui la relie à des phénotypes cellulaires tels qu’un contrôle du cycle cellulaire modifié, une sensibilité à l’apoptose et un remodelage métabolique. Ces caractéristiques font d’UBD un nœud utile pour étudier les changements de stabilité du protéome induits par les cytokines et les programmes de signalisation liés à l’immunité.
FAT10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UBD dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UBD. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UBD. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UBD.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.