FAM55D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412343

Visão geral

NXPE4 codifica a proteína humana FAM55D, um membro da família de proteínas com domínio neurexofilina e PC-esterase, que se prevê ser secretada ou associada à membrana e enriquecida em contextos neurais. Embora a sua função molecular permaneça incompletamente caracterizada, as características da família sugerem papéis em interações proteicas extracelulares e em processos de comunicação célula–célula que podem influenciar a conectividade neuronal e a organização sináptica. Variações ao nível do transcrito e padrões de expressão específicos de tecido têm sido explorados em conjuntos de dados genómicos, apoiando a continuação da investigação de NXPE4 em neurobiologia e nas redes regulatórias que moldam o desenvolvimento e a função do cérebro. Alterações na expressão de NXPE4 foram relatadas em estudos de associação em coortes relevantes para doenças, motivando estudos mecanísticos para definir como a perturbação impacta fenótipos celulares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FAM55D (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NXPE4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NXPE4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NXPE4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FAM55D.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NXPE4 para a investigação da sinalização de FAM55D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NXPE4 críticos para a função FAM55D
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NXPE4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FAM55D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FAM55D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NXPE4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FAM55D Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FAM55D (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NXPE4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NXPE4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.