FAM118B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413182

Visão geral

FAM118B codifica uma proteína humana pouco caracterizada, que se prevê participar na homeostase celular fundamental, com evidências emergentes a ligar membros da família FAM118 a processos associados ao RNA e à organização nuclear. A expressão basal de FAM118B em diversos tecidos sugere um papel na manutenção de programas centrais de expressão génica que se cruzam com a progressão do ciclo celular, respostas ao stress e redes de proteostase. Foram reportados padrões de expressão alterados em conjuntos de dados multi-ómicos de cancro e noutros contextos de doença, apoiando a sua utilização como regulador candidato em estudos de biologia tumoral e aptidão celular. Como a sua função molecular permanece incompletamente definida, o FAM118B é particularmente adequado para investigação orientada por hipóteses usando perturbação genética, de modo a mapear vias a jusante e parceiros de interação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FAM118B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FAM118B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FAM118B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FAM118B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FAM118B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FAM118B para a investigação da sinalização de FAM118B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FAM118B críticos para a função FAM118B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FAM118B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FAM118B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FAM118B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FAM118B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FAM118B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FAM118B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FAM118B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FAM118B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.