EYA4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404355

개요

EYA4는 전사 공동활성화 인자이자 인산가수분해효소로 기능하는 Eyes Absent(EYA) 계열 단백질의 한 구성원을 암호화하며, 발달 및 스트레스 반응성 신호 프로그램을 통합합니다. EYA4는 SIX 및 DACH 단백질과의 상호작용을 통해 세포 운명 결정, 분화, 조직 특이적 형태형성을 조절하는 유전자 조절 네트워크에 기여합니다. 이 단백질의 티로신 인산가수분해효소 활성은 DNA 손상 반응의 조절 및 세포 항상성을 형성하는 기타 인산화 의존적 과정의 조절과 연관되어 있는 것으로 알려져 있습니다. EYA4의 발현 변화 또는 유전체 수준의 이상은 감각 및 심장 관련 표현형과 연관되며, 종양 관련 후성유전적 침묵화 연구에서도 보고되어 인간 질환 모델에서의 기전 연구에 대한 관련성을 뒷받침합니다.

EYA4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 EYA4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 EYA4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 EYA4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EYA4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EYA4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 EYA4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EYA4 기능에 중요한 EYA4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 EYA4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EYA4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 EYA4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 EYA4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EYA4 HDR 플라스미드 (h) 및 EYA4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 EYA4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 EYA4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.