Plasmide Double Nickase (h) Exportin 7: sc-405335-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Exportin 7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Exportin 7 Double Nickase (h) et le plasmide Exportin 7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant XPO7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Exportin 7 Antibody (A-11): sc-390025
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Exportin 7 | sc-405335-NIC | 20 µg | $410.00 |
XPO7 code l’exportine 7, un récepteur d’export nucléaire de la famille des karyophérines-β qui assure, de manière dépendante de RanGTP, le transport de cargos protéiques spécifiques du noyau vers le cytoplasme. En contrôlant la répartition nucléocytoplasmique de facteurs régulateurs, l’exportine 7 contribue à la protéostasie, à la progression du cycle cellulaire et à des programmes transcriptionnels sensibles au stress. Une dérégulation du transport nucléaire est une caractéristique récurrente des cancers et des maladies neurodégénératives, faisant de XPO7 un nœud utile pour étudier comment des défauts de trafic remodèlent les réseaux de signalisation. L’étude de la fonction de XPO7 peut éclairer les liens, à l’échelle des voies, entre l’export nucléaire, la régulation du système ubiquitine–protéasome et des états de différenciation cellulaire dépendants du contexte.
Exportin 7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus XPO7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de XPO7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de XPO7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de XPO7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.