Plásmido Doble Nickase (m) ErbB3/HER3: sc-420219-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ErbB3/HER3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ErbB3/HER3 (m) y el plásmido de doble nickasa ErbB3/HER3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Erbb3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ErbB3/HER3 Anticuerpo (G-4): sc-7390
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ErbB3/HER3 | sc-420219-NIC | 20 µg | $410.00 |
Erbb3 codifica el receptor tirosina cinasa ErbB3/HER3, un miembro de la familia EGFR/ErbB que funciona principalmente mediante la heterodimerización con cinasas como ERBB2 para iniciar la señalización aguas abajo. A pesar de su actividad cinasa intrínseca limitada, ErbB3 aporta múltiples motivos de unión a PI3K y constituye un nodo clave en la regulación de las vías PI3K–AKT y MAPK, influyendo en la proliferación, la supervivencia, la diferenciación y el desarrollo epitelial en tejidos de ratón. La unión de ligandos (p. ej., neuregulinas) y la comunicación cruzada entre receptores moldean las respuestas celulares, lo que hace de Erbb3 un foco mecanístico frecuente en estudios sobre integración de la señalización de receptores. La señalización desregulada de ErbB3/HER3 se examina con frecuencia en el remodelado de vías oncogénicas, la señalización adaptativa a terapias y fenotipos del desarrollo relevantes para modelos de enfermedad.
ErbB3/HER3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Erbb3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Erbb3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Erbb3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Erbb3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.