Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401146-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EP4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EP4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EP4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PTGER4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EP4 Anticorpo (C-4): sc-55596
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTGER4 codifica o receptor humano de prostaglandina E2 EP4, um receptor acoplado à proteína G que sinaliza principalmente via Gs para elevar o cAMP e ativar programas transcricionais dependentes de PKA/CREB. O EP4 também aciona sinalização ligada a β-arrestina e às vias PI3K/AKT e ERK/MAPK, coordenando a regulação de respostas inflamatórias, do tônus vascular, da função de barreira epitelial e da migração celular. Em compartimentos imunes e estromais, o EP4 modula a produção de citocinas e o tráfego de leucócitos a jusante de PGE2 derivada da COX, integrando a sinalização por prostanoides a redes imunorregulatórias mais amplas. A atividade desregulada de PTGER4/EP4 tem sido associada a fenótipos inflamatórios crónicos e a alterações da homeostase tecidual, sustentando o seu uso como um nó mecanístico em estudos da biologia de doenças associadas à inflamação.
EP4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PTGER4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PTGER4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PTGER4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PTGER4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.