Emx2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420170

Descripción general

EMX2 (empty spiracles homeobox 2) es un factor de transcripción con dominio homeobox que controla la regionalización y las decisiones de destino celular durante la embriogénesis, con funciones destacadas en la especificación del prosencéfalo y la arealización cortical, así como en el desarrollo urogenital y de las extremidades en el ratón. Regula programas de expresión génica del desarrollo uniéndose a elementos cis-reguladores y coordinando redes que interactúan con la señalización de morfógenos WNT/β-catenina, FGF y BMP, influyendo en la proliferación y diferenciación de progenitores y en la formación de límites tisulares. La alteración de la dosis o de la actividad reguladora de Emx2 se ha asociado con anomalías del neurodesarrollo y malformaciones estructurales, y se ha descrito la expresión desregulada de EMX2 en múltiples contextos tumorales como marcador de estados de diferenciación aberrantes. Estas características convierten a Emx2 en un nodo útil para estudiar el control transcripcional de vías del desarrollo y la especificación de linajes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Emx2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Emx2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Emx2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Emx2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Emx2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Emx2 para la investigación de la señalización de Emx2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Emx2 críticos para la función de Emx2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Emx2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Emx2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Emx2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Emx2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Emx2 (m) y el plásmido HDR Emx2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Emx2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Emx2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.