ELOVL6 Lentiviral Activation Particles (h): sc-413125-LAC

ELOVL6 kodiert eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte Elongase, die geschwindigkeitsbestimmende Schritte bei der Verlängerung langkettiger gesättigter und einfach ungesättigter Fettsäuren katalysiert, einschließlich der Umwandlung von C16- in C18-Spezies. Durch die Prägung der zellulären Lipidzusammensetzung beeinflusst ELOVL6 die Biophysik von Membranen, die Homöostase von Lipidtröpfchen sowie nachgeschaltete Lipidsignalwege, die mit der Kopplung von Glykolyse und Lipogenese und dem Fettsäurestoffwechsel verknüpft sind. Eine veränderte ELOVL6-Aktivität wird mit dem metabolischen Remodeling in Verbindung gebracht, das bei Insulinresistenz, hepatischer Steatose sowie einer gestörten Lipidverarbeitung im Fettgewebe und in der Leber beobachtet wird, und wurde in Kontexten untersucht, in denen die Lipidverfügbarkeit proliferative und entzündliche Programme unterstützt. Daher wird ELOVL6 häufig im Hinblick auf seine Rolle in der lipidgetriebenen Regulation von Organelle-Stressantworten und der Wechselwirkung zwischen Stoffwechselwegen untersucht.

ELOVL6 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ELOVL6-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ELOVL6 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ELOVL6-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ELOVL6-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ELOVL6-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.