ELL Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420159

Descripción general

Ell codifica ELL, un factor de elongación de la ARN polimerasa II que promueve una transcripción procesiva al limitar las pausas de la polimerasa y favorecer la síntesis productiva de ARNm. ELL participa en complejos reguladores de la transcripción que coordinan la elongación con el contexto de la cromatina y el procesamiento de ARN, influyendo así en programas de expresión génica vinculados a la identidad celular y la proliferación. La alteración de la elongación dependiente de ELL puede modificar la fidelidad transcripcional y las vías de respuesta al estrés, por lo que resulta relevante para investigar los mecanismos que subyacen a la expresión génica desregulada en redes transcripcionales asociadas al cáncer. En modelos murinos, Ell ofrece un punto de entrada manejable para estudiar el control de la elongación a lo largo del desarrollo, la regulación hematopoyética y la dinámica transcripcional a escala genómica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ELL (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ell en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ell junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ell tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ELL.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ell para la investigación de la señalización de ELL, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ell críticos para la función de ELL
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ell para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ELL CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ELL CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ell. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ELL (m) y el plásmido HDR ELL (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ell para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ell definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.