Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) eIF4AI: sc-402623-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)eIF4AI consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa eIF4AI (h) y el plásmido de doble nickasa eIF4AI (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EIF4A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) eIF4AI | sc-402623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) eIF4AI | sc-402623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A1 codifica la helicasa de ARN DEAD-box eIF4AI humana, un componente central del complejo de iniciación de la traducción eIF4F que desenrolla UTR 5′ estructuradas para permitir el escaneo del complejo de preiniciación 43S y el reconocimiento del codón de inicio. Al controlar la traducción de ARNm dependiente de caperuza, eIF4AI influye en la proteostasis, la progresión del ciclo celular y los programas de adaptación al estrés, integrándose con nodos de señalización que modulan la iniciación, como mTOR/4E-BP y las vías MAPK. La actividad alterada de EIF4A1 y la dependencia de la traducción impulsada por eIF4A se estudian con frecuencia en contextos de crecimiento y supervivencia desregulados, incluidos programas transcripcionales oncogénicos y respuestas al estrés. EIF4A1 también se utiliza como punto de entrada mecanístico para investigar la reprogramación translacional, la función de las helicasas de ARN y la traducción selectiva de subconjuntos complejos de ARNm.
eIF4AI El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EIF4A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EIF4A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EIF4A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EIF4A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.