Plasmide Double Nickase (h) EBF3: sc-402181-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EBF3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EBF3 Double Nickase (h) et le plasmide EBF3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EBF3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EBF3 Antibody (N7Q): sc-81999
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EBF3 | sc-402181-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EBF3 | sc-402181-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EBF3 code un facteur de transcription de la famille « early B‑cell factor » qui se lie à l’ADN via un motif hélice–boucle–hélice conservé afin de réguler des programmes géniques contrôlant la différenciation neuronale, la progression du cycle cellulaire et la spécification des lignées cellulaires. Dans les cellules humaines, EBF3 s’intègre à des réseaux transcriptionnels qui modulent l’accessibilité de la chromatine et coordonnent le calendrier du développement dans des contextes à la fois neuronaux et mésenchymateux. Des altérations d’EBF3 ont été associées à des troubles du neurodéveloppement, notamment à des tableaux syndromiques avec déficience intellectuelle et ataxie, ce qui concorde avec son rôle dans la maturation neuronale et la formation des circuits. Comme EBF3 influence de larges cascades transcriptionnelles, il est fréquemment étudié dans des modèles de régulation génique du développement, d’identité cellulaire et de transcription répondant au stress.
EBF3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EBF3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EBF3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EBF3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EBF3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.