Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Dynamin II: sc-401037-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Dynamin II consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Dynamin II (h) y el plásmido de doble nickasa Dynamin II (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DNM2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Dynamin II Anticuerpo (G-4): sc-166669
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Dynamin II | sc-401037-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Dynamin II | sc-401037-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DNM2 codifica la dinamina II, una GTPasa grande que cataliza la fisión de membranas durante la endocitosis mediada por clatrina y otros eventos de tráfico vesicular. Mediante interacciones con fosfoinosítidos y proteínas con dominio SH3, la dinamina II coordina la internalización de receptores, el reciclaje de vesículas sinápticas y la dinámica de los endosomas, vinculando la remodelación de la membrana con la organización del citoesqueleto de actina. La actividad de DNM2 influye en vías de señalización al controlar el tráfico y el recambio de receptores de superficie, con efectos posteriores en la proliferación, la migración y la homeostasis celulares. Las variantes y la desregulación de DNM2 se asocian con fenotipos neuromusculares y neurodegenerativos, y se estudian ampliamente en el contexto de defectos del tráfico de membranas y anomalías del citoesqueleto.
Dynamin II El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DNM2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DNM2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DNM2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DNM2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.