Plásmido Doble Nickase (h) DTWD2: sc-415433-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DTWD2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DTWD2 (h) y el plásmido de doble nickasa DTWD2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DTWD2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DTWD2 | sc-415433-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DTWD2 | sc-415433-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTWD2 (dominio DTW que contiene 2) codifica una enzima conservada implicada en la regulación postranscripcional mediante la modificación de ARN, con una actividad descrita compatible con la aminocarboxipropilación de la uridina en la posición “wobble” del tRNA, lo que puede influir en la decodificación de codones y en la fidelidad de la traducción. Al moldear los estados de modificación del tRNA, DTWD2 puede afectar la proteostasis, las respuestas al estrés y programas posteriores de expresión génica vinculados al crecimiento y la diferenciación celular. La alteración de las vías de modificación del tRNA se asocia con frecuencia a cambios en el control traduccional observados en cáncer y en fenotipos del neurodesarrollo, lo que convierte a DTWD2 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de la regulación epitranscriptómica del ARN en células humanas.
DTWD2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DTWD2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DTWD2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DTWD2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DTWD2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.