Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO dsg1 (h): sc-401442
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- dsg1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique dsg1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: dsg1 Antibody (B-11): sc-137164
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO dsg1 (h) | sc-401442 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
DSG1 code la desmogléine 1 (dsg1), une protéine d’adhésion desmosomale de la famille des cadherines qui renforce les jonctions cellule–cellule dans les épithéliums stratifiés et contribue à l’intégrité de la barrière épidermique. En s’associant à la plakoglobine, aux plakophilines et à la desmoplakine, DSG1 relie l’adhésion intercellulaire aux réseaux de filaments intermédiaires et coordonne la différenciation, la résistance mécanique et la morphogenèse tissulaire. Une perturbation de l’assemblage des desmosomes dépendant de DSG1 peut modifier la signalisation des kératinocytes, le remodelage des jonctions et les réponses au stress. Des dysfonctionnements de DSG1, d’origine génétique ou acquis, sont associés à une fragilité cutanée et à des phénotypes inflammatoires, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier l’homéostasie épithéliale et les mécanismes des maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO dsg1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène DSG1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du DSG1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert DSG1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine dsg1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en DSG1 pour l'étude de la signalisation de dsg1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de DSG1 essentiels à la fonction de dsg1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de DSG1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le dsg1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le dsg1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus DSG1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le dsg1 plasmide HDR (h) et le dsg1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie DSG1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles DSG1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.