Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DRAK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404787
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DRAK2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DRAK2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DRAK2 Anticuerpo (C-2): sc-398324
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DRAK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404787 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
STK17B codifica DRAK2, una quinasa de serina/treonina de la familia de quinasas asociadas a muerte celular (death-associated protein kinase) que modula los umbrales de señalización en células inmunitarias. DRAK2 se ha vinculado con la regulación de la activación dependiente del receptor de células T, la dinámica de la señalización de Ca2+ y los programas transcripcionales posteriores que moldean la proliferación, las respuestas de citocinas y la supervivencia. A través de estas funciones, contribuye al control de la apoptosis y de las respuestas al estrés celular, integrándose con vías que influyen en la homeostasis inmunitaria y la inflamación. La actividad o expresión alteradas de STK17B se han asociado con desregulación inmunitaria y con contextos de enfermedad inflamatoria, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos en biología de leucocitos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DRAK2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STK17B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STK17B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STK17B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DRAK2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STK17B para la investigación de la señalización de DRAK2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de STK17B críticos para la función de DRAK2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STK17B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DRAK2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DRAK2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STK17B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DRAK2 (h) y el plásmido HDR DRAK2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STK17B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STK17B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.