Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO DNCLI1 (h): sc-412128
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- DNCLI1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique DNCLI1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DNCLI1 Antibody (H-7): sc-514141
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO DNCLI1 (h) | sc-412128 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
DYNC1LI1 code la chaîne légère intermédiaire 1 de la dynéine cytoplasmique 1 (DNCLI1), une sous-unité essentielle du complexe moteur dynéine-1 cytoplasmique, qui assure un transport dirigé vers l’extrémité moins le long des microtubules. DNCLI1 contribue à la liaison des cargaisons et à la régulation du moteur, soutenant des processus tels que le trafic des vésicules et des organites, le positionnement endosome–lysosome, l’organisation de l’appareil de Golgi et le transport axonal rétrograde. Par ces fonctions, DYNC1LI1 influence la polarité cellulaire, la dynamique du fuseau mitotique et l’homéostasie neuronale, reliant les défauts de transport dépendant de la dynéine à des mécanismes de maladies neurodéveloppementales et neurodégénératives. Une altération de la fonction du complexe dynéine est également pertinente pour des voies contrôlant les réponses au stress et la signalisation intracellulaire, qui dépendent d’une localisation précise des cargaisons.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO DNCLI1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène DYNC1LI1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du DYNC1LI1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert DYNC1LI1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine DNCLI1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en DYNC1LI1 pour l'étude de la signalisation de DNCLI1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de DYNC1LI1 essentiels à la fonction de DNCLI1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de DYNC1LI1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le DNCLI1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le DNCLI1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus DYNC1LI1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le DNCLI1 plasmide HDR (h) et le DNCLI1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie DYNC1LI1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles DYNC1LI1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.