Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DMPK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402727-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DMPKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DMPK (h) e o Plasmídeo Double Nickase DMPK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DMPK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DMPK Anticorpo (9-RY26): sc-134319
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DMPK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402727-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DMPK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402727-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DMPK (dystrophia myotonica–protein kinase) codifica uma quinase de serina/treonina que se localiza em compartimentos citoplasmáticos e associados à membrana e contribui para a regulação do citoesqueleto de actina, da adesão celular e da organização miofibrilar. A sinalização de DMPK interage com vias dependentes de GTPases da família Rho e influencia a excitabilidade celular e a integridade estrutural no músculo e noutros tecidos. Alterações na biologia de DMPK estão intimamente ligadas à distrofia miotónica tipo 1, em que repetições CTG expandidas no locus DMPK promovem uma desregulação, mediada por RNA, do splicing alternativo e defeitos subsequentes na função muscular, cardíaca e neuronal. A modulação experimental de DMPK é, portanto, útil para dissecar a sinalização dependente de quinase e mecanismos associados a repetições que afetam a arquitetura celular e o processamento de RNA.
DMPK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DMPK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DMPK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DMPK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DMPK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.