Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Dlx-5 Double Nickase Plasmid (h): sc-401825-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Dlx-5 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Dlx-5 Double-Nickase-Plasmid (h) und Dlx-5 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DLX5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Dlx-5: sc-398150
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Dlx-5 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dlx-5 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLX5 kodiert Dlx-5, einen Homeobox-Transkriptionsfaktor, der während der Entwicklung die Festlegung von Zellschicksalen und Musterbildungsprogramme steuert und dabei insbesondere an der osteogenen Differenzierung sowie der Morphogenese des kraniofazialen Bereichs, der Gliedmaßen und des Innenohrs beteiligt ist. Dlx-5 wirkt in Netzwerken der Transkriptionsregulation nachgeschaltet an Entwicklungs-Signalwegen wie BMP/TGF-β und interagiert mit RUNX2-zentrierten Genprogrammen, um die Expression extrazellulärer Matrix- und mineralisationsassoziierter Gene zu kontrollieren. Veränderungen der DLX5-Gen-Dosis oder Störungen seiner Regulation wurden mit Phänotypen angeborener Fehlbildungen in Verbindung gebracht; zudem wurde eine fehlregulierte DLX5-Expression im Kontext aberranter Proliferation und Differenzierung in der Krebsbiologie beschrieben. Als Regulator von Zelllinie und Differenzierung wird DLX5 häufig in Modellen der Skelettentwicklung, epithelial-mesenchymaler Transitionen und neuralleistenderivierter Gewebe untersucht.
Dlx-5 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DLX5-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DLX5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DLX5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DLX5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.