Plasmide Double Nickase (m) Dkk-3: sc-424494-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Dkk-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Dkk-3 Double Nickase (m) et le plasmide Dkk-3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Dkk3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Dkk-3 | sc-424494-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Dkk-3 | sc-424494-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine 3 apparentée à Dickkopf (Dkk-3) est une glycoprotéine sécrétée qui module la signalisation extracellulaire, avec des effets dépendants du contexte sur l’activité de la voie Wnt/β-caténine et, plus largement, un dialogue avec d’autres voies qui gouvernent les décisions de destinée cellulaire. Dans les tissus de souris, l’expression de Dkk3 a été associée à la régulation de la prolifération, de la différenciation et du remodelage tissulaire, notamment via des effets sur les interactions stroma–épithélium et sur les microenvironnements immunitaires. Des niveaux altérés de Dkk3 sont rapportés dans de multiples contextes pertinents pour les maladies, tels que la biologie tumorale, la fibrose et le remodelage métabolique ou cardiovasculaire, où des variations des programmes transcriptionnels associés à Wnt peuvent influencer les transitions d’état cellulaire. Ces caractéristiques font de Dkk3 un nœud utile pour disséquer la signalisation paracrine et la dynamique des voies dans des modèles mécanistiques.
Dkk-3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Dkk3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Dkk3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Dkk3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Dkk3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.