Plasmide Double Nickase (h) DIO3: sc-403729-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DIO3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DIO3 Double Nickase (h) et le plasmide DIO3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DIO3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DIO3 | sc-403729-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DIO3 | sc-403729-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DIO3 code l’iodothyronine désiodase de type III, une sélénioenzyme associée au réticulum endoplasmique qui inactive les hormones thyroïdiennes en convertissant la T4 en T3 inverse (rT3) et la T3 en T2, limitant ainsi la signalisation intracellulaire des hormones thyroïdiennes. En contrôlant la disponibilité locale des hormones, DIO3 influence des programmes transcriptionnels dépendants des récepteurs des hormones thyroïdiennes qui régulent la prolifération, la différenciation et l’homéostasie métabolique au cours du développement et du remodelage tissulaire. Une expression dérégulée de DIO3 est associée à une altération de la signalisation endocrine dans des contextes cancéreux et développementaux, et elle est également impliquée dans une régulation liée à l’empreinte génomique au sein de la région génomique DLK1–DIO3. Ces caractéristiques font de DIO3 un nœud utile pour étudier le métabolisme hormonal, la biologie des sélénoprotéines sensibles à l’état rédox et les interactions entre voies de signalisation qui façonnent les transitions d’état cellulaire.
DIO3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DIO3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DIO3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DIO3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DIO3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.