Plasmide Double Nickase (h) DHRS1: sc-414077-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DHRS1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DHRS1 Double Nickase (h) et le plasmide DHRS1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DHRS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DHRS1 | sc-414077-NIC | 20 µg | $410.00 |
DHRS1 (déshydrogénase/réductase 1) code une déshydrogénase/réductase cytosolique à chaîne courte qui catalyse des réactions d’oxydo‑réduction dépendantes du NAD(P)H, contribuant au métabolisme cellulaire des composés carbonylés et au maintien de l’équilibre rédox. En modulant l’interconversion des aldéhydes, des cétones et de métabolites apparentés dérivés des lipides et des stéroïdes, DHRS1 peut influencer l’homéostasie métabolique et les réponses au stress oxydant. Une expression ou une activité altérée des enzymes SDR a été associée à une dérégulation du métabolisme lipidique et de la signalisation rédox dans divers contextes pathologiques humains, notamment la reprogrammation métabolique liée au cancer. DHRS1 est donc étudié dans des voies reliant le stress oxydant, la fonction mitochondriale et la régulation de la croissance et de la différenciation cellulaires induite par les métabolites.
DHRS1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DHRS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DHRS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DHRS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DHRS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.