DFNA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410760-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DFNA5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DFNA5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DFNA5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DFNA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DFNA5 Anticorpo (G-9): sc-393162
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DFNA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410760-NIC | 20 µg | $410.00 |
DFNA5 (também conhecido como GSDME) codifica uma proteína da família das gasderminas que conecta a ativação de proteases à formação de poros na membrana e à morte celular programada. Após clivagem pela caspase-3, o DFNA5 pode desencadear um programa de morte celular lítica e inflamatória que envolve a transição de apoptose para piroptose e influencia a liberação de citocinas, a integridade da membrana e a sinalização imune inata. A atividade do DFNA5 tem sido implicada em respostas ao estresse epitelial e na biologia tumoral, e variantes germinativas estão associadas à perda auditiva não sindrômica autossômica dominante (DFNA5). Essas características tornam o DFNA5 um nó útil para estudar morte celular regulada, sinalização inflamatória e mecanismos de vulnerabilidade específicos de tecidos.
DFNA5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DFNA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DFNA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DFNA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DFNA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.