DDX3X Lentiviral Activation Particles (h): sc-401253-LAC

DDX3X kodiert eine ATP-abhängige DEAD-Box-RNA-Helikase, die mehrere Schritte des RNA-Stoffwechsels koordiniert, darunter mRNA-Export, Initiation der Translation und die Dynamik von RNA-Granula während zellulären Stresses. Über Interaktionen mit Ribonukleoprotein-Komplexen und Signalvermittlern verknüpft DDX3X posttranskriptionelle Regulation mit Signalwegen, die Zellzyklusprogression, angeborene Immunsensorik und Stressantworten steuern. Eine veränderte DDX3X-Aktivität wurde mit gestörter RNA-Homöostase sowie einer fehlregulierten Kontrolle von Proliferations- und Differenzierungsprogrammen in Verbindung gebracht, was DDX3X für Studien zur Neuroentwicklung, zur Virus-Wirt-Faktor-Biologie und zum krebsassoziierten Remodeling des Transkriptoms relevant macht. In menschlichen Zellen dient DDX3X als zentraler Knotenpunkt, um zu untersuchen, wie die Funktion von RNA-Helikasen die Genexpressionsausgänge unter basalen Bedingungen und unter Stress prägt.

DDX3X Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente DDX3X-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

DDX3X Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der DDX3X-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen DDX3X-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen DDX3X-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.