Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DDX3X Double Nickase Plasmid (h): sc-401253-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DDX3X Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DDX3X Double-Nickase-Plasmid (h) und DDX3X Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DDX3X abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: DDX3: sc-81247
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DDX3X Double Nickase Plasmid (h) | sc-401253-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX3X Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401253-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX3X kodiert eine ATP-abhängige DEAD-Box-RNA-Helikase, die mehrere Schritte des RNA-Stoffwechsels koordiniert, darunter das Spleißen von Prä-mRNA, den mRNA-Export, die Initiation der Translation und die Dynamik von Stressgranula. Durch das Remodelling von RNA-Protein-Komplexen integriert DDX3X Signale, die den Zellzyklusverlauf, die angeborene Immunerkennung und zelluläre Stressantworten beeinflussen. Eine Fehlregulation oder Mutation von DDX3X wurde mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht und wiederholt in verschiedensten Krebskontexten beobachtet, was seinen breiten Einfluss auf die RNA-Prozessierung und die Proteostase widerspiegelt. Diese Eigenschaften machen DDX3X zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung der Funktion von RNA-Helikasen, der Translationskontrolle und von Signalwegen, die RNA-Regulation mit Proliferation und Stressanpassung koppeln.
DDX3X Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DDX3X-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DDX3X abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DDX3X-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DDX3X-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.