Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DDAH I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402719
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDAH I O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DDAH I, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDAH I Anticorpo (D-6): sc-514841
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDAH I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402719 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DDAH1 codifica a dimetilarginina dimetilamino-hidrolase 1 (DDAH I), uma enzima citosólica que hidrolisa a dimetilarginina assimétrica (ADMA) e metilargininas relacionadas, modulando assim a atividade da óxido nítrico sintase e a biodisponibilidade celular de óxido nítrico (NO). Por meio da regulação do eixo ADMA–NO, a DDAH I influencia a função endotelial, o equilíbrio redox, o tônus vascular e vias de sinalização inflamatórias. Alterações na expressão ou atividade de DDAH1 têm sido associadas a fenótipos cardiovasculares e metabólicos e são frequentemente investigadas em contextos de disfunção endotelial e estresse oxidativo. DDAH1 também é estudado em biologia tumoral e remodelamento tecidual, onde a sinalização dependente de NO impacta a angiogênese e a migração celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDAH I (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DDAH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DDAH1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DDAH1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDAH I.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DDAH1 para a investigação da sinalização de DDAH I, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DDAH1 críticos para a função DDAH I
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DDAH1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DDAH I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DDAH I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DDAH1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DDAH I Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DDAH I (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DDAH1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DDAH1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.