Particules Lentivirales d'Activation (h) cytoglobin: sc-402949-LAC

Le gène humain **CYGB** code la cytoglobine, une globine hexacoordinée exprimée dans de multiples tissus, qui se lie à l’oxygène et au monoxyde d’azote et contribue à l’équilibre rédox. La cytoglobine participe aux réponses cellulaires à l’hypoxie et au stress oxydant en modulant la gestion des espèces réactives de l’oxygène et la biodisponibilité du monoxyde d’azote, influençant la fonction mitochondriale et des programmes transcriptionnels d’adaptation au stress. Une expression altérée de **CYGB** a été rapportée dans des contextes de remodelage tissulaire et de fibrose, de dysfonction vasculaire et de biologie tumorale, où la cytoglobine a été associée à des changements de survie cellulaire, de métabolisme et de signalisation de la matrice extracellulaire. Ces propriétés font de **CYGB** une cible utile pour disséquer les voies de détection de l’oxygène, les voies régulées par le rédox et les réponses au stress dans des modèles cellulaires pertinents sur le plan physiologique.

Les particules d'activation lentivirales cytoglobin (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de CYGB dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales cytoglobin (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription CYGB, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de cytoglobin. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif CYGB ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.