CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432749
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYTIP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CYTIP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CYTIP Anticorpo (H-6): sc-390857
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432749 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cytip (proteína de interação com a citohesina 1) codifica a CYTIP, uma proteína adaptadora que regula a sinalização mediada por citohesinas/GTPases ARF e ajuda a coordenar a adesão dependente de integrinas e a remodelação do citoesqueleto. Em células imunes, a CYTIP contribui para a sinalização “inside-out” que ajusta as interações LFA-1/ICAM, influenciando a motilidade dos leucócitos, a estabilidade da sinapse imune e a dinâmica dos contactos célula–célula. Por meio dessas funções, o Cytip está ligado a vias que controlam a ativação, a migração e a infiltração tecidual de linfócitos, tornando-se relevante para estudos mecanísticos de regulação imunitária e de fenótipos associados à inflamação. Assim, a perturbação do Cytip em camundongos é útil para dissecar como a sinalização de adesão se integra a programas a jusante de polarização e tráfego in vivo e em modelos imunes cultivados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CYTIP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cytip em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cytip, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cytip na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CYTIP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cytip para a investigação da sinalização de CYTIP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cytip críticos para a função CYTIP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cytip para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CYTIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cytip. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CYTIP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CYTIP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cytip para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cytip definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.