CYP26B1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403610

Descripción general

CYP26B1 codifica una hidroxilasa de ácido retinoico del citocromo P450 que cataliza el catabolismo oxidativo del ácido retinoico todo‑trans y de retinoides relacionados, controlando así los gradientes intracelulares de retinoides. Al ajustar la disponibilidad de ácido retinoico, CYP26B1 influye en programas transcripcionales dependientes de los receptores de ácido retinoico (RAR/RXR) que regulan la diferenciación, la morfogénesis y la homeostasis tisular. Su actividad se entrecruza con redes de señalización del desarrollo y con decisiones de destino celular a través del metabolismo de retinoides y de vías reguladoras génicas aguas abajo. La desregulación de la expresión o la función de CYP26B1 se ha implicado en fenotipos congénitos del desarrollo y en contextos de señalización de retinoides alterada relevantes para la biología del cáncer y los procesos inflamatorios, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la homeostasis de retinoides.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CYP26B1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CYP26B1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CYP26B1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CYP26B1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CYP26B1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CYP26B1 para la investigación de la señalización de CYP26B1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CYP26B1 críticos para la función de CYP26B1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CYP26B1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CYP26B1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CYP26B1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CYP26B1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CYP26B1 (h) y el plásmido HDR CYP26B1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CYP26B1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CYP26B1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.