Plásmido Doble Nickase (m) cyclin M1: sc-429932-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)cyclin M1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cyclin M1 (m) y el plásmido de doble nickasa cyclin M1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cnnm1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) cyclin M1 | sc-429932-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cnnm1 codifica la ciclina M1, un regulador conservado asociado a la membrana del transporte de cationes divalentes, que contribuye a la homeostasis celular del magnesio y a la señalización dependiente de iones. Mediante el control de los niveles intracelulares de Mg²⁺, la ciclina M1 puede influir en la actividad enzimática dependiente de ATP, la señalización por quinasas y procesos metabólicos sensibles a la disponibilidad de magnesio. En sistemas murinos, la función de Cnnm1 es relevante para estudios sobre el manejo de electrolitos y las respuestas al estrés celular, y el equilibrio catiónico alterado se ha asociado con fenotipos que afectan a tejidos excitables y a la fisiología renal. Estas características hacen de Cnnm1 una diana útil para desentrañar vías de transporte iónico y redes de señalización downstream en modelos de investigación biomédica.
cyclin M1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cnnm1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cnnm1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cnnm1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cnnm1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.