CUZD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407311

Übersicht

CUZD1 (CUB- und Zona-pellucida-ähnliche Domänen 1) kodiert ein sezerniertes und membranassoziiertes Protein, das an der Differenzierung epithelialer Zellen und der Homöostase sekretorischer Gewebe beteiligt ist. CUZD1 wirkt an Prozessen mit, die mit Proteintransport und regulierter Sekretion verknüpft sind, und wurde mit Transkriptionsprogrammen nachgeschaltet an Zytokinsignale in Verbindung gebracht, einschließlich Signalwegen, die mit der JAK/STAT-Aktivität in Drüsenepithelien assoziiert sind. Eine veränderte CUZD1-Expression wurde bei epithelial abgeleiteten Malignomen und in entzündlichen Zuständen beschrieben, was seine Nutzung als molekularer Knotenpunkt zur Untersuchung von Zellzustandsübergängen, Stressantworten und tumorassoziierten Phänotypen unterstützt. In humanen Modellsystemen stellt CUZD1 ein gut handhabbares Ziel dar, um Mechanismen des epithelialen Remodellings und kontextabhängige Signalausgänge zu analysieren.

Das CUZD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CUZD1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CUZD1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CUZD1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CUZD1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CUZD1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CUZD1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CUZD1-Exone abzielen, die für die CUZD1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CUZD1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CUZD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CUZD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CUZD1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CUZD1 HDR-Plasmid (h) und CUZD1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CUZD1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CUZD1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.