Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) CRIK: sc-417835-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CRIK consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CRIK (h) y el plásmido de doble nickasa CRIK (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CIT. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CRIK Anticuerpo (E-6): sc-390437
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CRIK | sc-417835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CRIK | sc-417835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La quinasa citron (CIT; CRIK) es una quinasa de serina/treonina asociada a RhoA que se localiza en el surco de segmentación y en el cuerpo medio para coordinar las etapas finales de la citocinesis. Favorece la organización del anillo contráctil y la abscisión al regular la dinámica actina–miosina y la remodelación del citoesqueleto, conectando la señalización de las GTPasas Rho con la progresión del ciclo celular. La alteración de la función de CIT puede provocar fallos de citocinesis, multinucleación e inestabilidad genómica, procesos que se relacionan con las respuestas al estrés mitótico y la biología tumoral. Además, CIT se ha estudiado en el contexto de tejidos proliferativos y programas del neurodesarrollo en los que una división celular precisa es esencial.
CRIK El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CIT en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CIT. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CIT. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CIT alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.