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CRIK双切口酶质粒(h) | sc-417835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRIK双切口酶质粒(h2) | sc-417835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
柠檬酸激酶(Citron kinase,CIT;CRIK)是一种与 RhoA 相关的丝氨酸/苏氨酸激酶,定位于分裂沟和中体(midbody),以协调细胞质分裂的后期过程。它通过调控肌动蛋白–肌球蛋白动力学和细胞骨架重塑,连接 Rho GTP 酶信号与细胞周期进程,从而支持收缩环的组织与最终断裂(abscission)。CIT 功能受损可导致细胞质分裂失败、多核化以及基因组不稳定;这些过程与有丝分裂应激反应和肿瘤生物学相互交织。此外,CIT 也常在增殖性组织和神经发育程序的研究中被关注,因为这些场景下精确的细胞分裂至关重要。
CRIK 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CIT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CIT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CIT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CIT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。