COL6A3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402899-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL6A3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COL6A3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COL6A3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COL6A3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COL6A3 Anticorpo (A-5): sc-515335
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL6A3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402899-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL6A3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402899-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano COL6A3 codifica a cadeia α3 do colágeno tipo VI, um componente-chave da matriz extracelular que se monta em redes microfibrilares, sustentando a resistência à tração dos tecidos e a mecanotransdução. O COL6A3 contribui para a adesão célula–matriz, a organização da matriz e a comunicação cruzada com vias de sinalização ligadas a integrinas e ao TGF-β, que influenciam a ativação de fibroblastos, a miogênese e a remodelação estromal. Alterações na expressão de COL6A3 ou na deposição de matriz estão associadas a fenótipos do tecido conjuntivo e neuromusculares, e o gene é frequentemente estudado em biologia da fibrose e do microambiente tumoral, onde a composição da matriz extracelular molda a migração e a diferenciação celulares. Como gene de matriz com forte dependência do contexto, o COL6A3 é comumente investigado em sistemas de cultura 3D, organoides e co-culturas para dissecar alterações no comportamento celular dirigidas pela matriz extracelular.
COL6A3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COL6A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COL6A3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COL6A3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COL6A3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.