Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) COL6A2: sc-403209-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)COL6A2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa COL6A2 (h) y el plásmido de doble nickasa COL6A2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a COL6A2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: COL6A2 Anticuerpo (B-7): sc-374566
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) COL6A2 | sc-403209-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) COL6A2 | sc-403209-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL6A2 codifica la cadena α2 del colágeno de tipo VI, un componente clave de la matriz extracelular que se ensambla con COL6A1 y COL6A3 en redes microfibrilares que rodean a muchos tipos celulares. Esta matriz de colágeno VI sostiene la arquitectura tisular, la adhesión célula–matriz y la mecanotransducción, modulando procesos como la miogénesis, el comportamiento de los fibroblastos y la remodelación de la matriz extracelular. La función de COL6A2 se integra con la señalización asociada a integrinas y distroglicano e influye en la supervivencia dependiente de la matriz y en las respuestas al estrés. Las variantes patogénicas de COL6A2 se asocian a miopatías relacionadas con el colágeno VI, incluida la distrofia muscular congénita de Ullrich y la miopatía de Bethlem, por lo que es un objetivo frecuente en estudios sobre la integridad muscular y la disfunción de la matriz extracelular.
COL6A2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus COL6A2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de COL6A2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de COL6A2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con COL6A2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.