Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CLIP-170 (m): sc-425158
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CLIP-170 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CLIP-170, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CLIP-170 Antibody (F-3): sc-28325
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CLIP-170 (m) | sc-425158 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Clip1 code CLIP-170, une protéine de suivi des extrémités plus des microtubules (+TIP) qui relie les extrémités dynamiques des microtubules à des sites corticaux et à des organites afin de coordonner le transport intracellulaire et l’architecture cellulaire. CLIP-170 participe à la régulation de la polymérisation des microtubules, à l’attachement kinétochore–microtubule pendant la mitose, ainsi qu’au trafic de complexes vésiculaires et protéiques via des interactions avec la dynéine/dynactine et d’autres réseaux de +TIP. Par ces fonctions, Clip1 contribue à des processus tels que la polarisation cellulaire, la migration et l’organisation du fuseau, fréquemment perturbés dans des contextes prolifératifs et neurodéveloppementaux. Les altérations de la dynamique des microtubules et de la fidélité de la ségrégation chromosomique associées aux voies dépendantes de CLIP-170 sont pertinentes pour l’étude de mécanismes liés à l’instabilité génomique et au dysfonctionnement du cytosquelette dans des modèles de maladie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CLIP-170 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Clip1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Clip1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Clip1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CLIP-170.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Clip1 pour l'étude de la signalisation de CLIP-170, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Clip1 essentiels à la fonction de CLIP-170
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Clip1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CLIP-170 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CLIP-170 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Clip1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CLIP-170 plasmide HDR (m) et le CLIP-170 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Clip1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Clip1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.