CLEC-2D CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412035

Übersicht

CLEC2D kodiert CLEC-2D, einen Typ-II-Transmembranliganden aus der Familie der C‑Typ-Lektin-ähnlichen Moleküle, der die Immunüberwachung moduliert, indem er an den inhibitorischen Rezeptor KLRB1/CD161 auf NK-Zellen und Subpopulationen von T‑Zellen bindet. Über diese Achse kann CLEC-2D zytotoxische Effektorfunktionen, die Zytokinproduktion sowie die Zell‑Zell‑Kommunikation an Immun‑Gewebe‑Grenzflächen beeinflussen. Die Expression von CLEC2D wird dynamisch durch zellulären Stress und Differenzierungszustände reguliert und ist damit mit Signalwegen verknüpft, die Immunflucht, Entzündung und Tumor‑Immun‑Interaktionen steuern. Eine dysregulierte CLEC2D-Signalgebung wurde in mehreren malignen Erkrankungen und entzündlichen Kontexten beschrieben, was CLEC2D als mechanistischen Knotenpunkt für die Untersuchung der NK-/T‑Zell‑Regulation in humanen Systemen stützt.

Das CLEC-2D CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CLEC2D-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CLEC2D-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CLEC2D nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CLEC-2D-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CLEC2D-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CLEC-2D-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CLEC2D-Exone abzielen, die für die CLEC-2D-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CLEC2D-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CLEC-2D CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CLEC-2D CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CLEC2D-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CLEC-2D HDR-Plasmid (h) und CLEC-2D HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CLEC2D-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CLEC2D-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.