CIP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406095
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CIP4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CIP4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CIP4 Anticorpo (F-10): sc-166810
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CIP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406095 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TRIP10 codifica a proteína 4 interagente com Cdc42 (CIP4), um adaptador com domínios F-BAR/SH3 que conecta a detecção de curvatura de membrana ao remodelamento do citoesqueleto de actina. A CIP4 coopera com Cdc42, dinamina e N-WASP para coordenar a endocitose mediada por clatrina, o tráfego vesicular e a montagem de actina cortical, influenciando assim a internalização de receptores e a atenuação de sinais. Por meio dessas funções, a CIP4 contribui para processos como polaridade celular, migração e a dinâmica de protrusões do tipo invadopódio, ligando-a a vias que regulam a organização do citoesqueleto e o remodelamento de membranas. A atividade desregulada de TRIP10/CIP4 tem sido estudada no contexto de motilidade celular aberrante e programas de sinalização relevantes para a biologia do câncer e outros distúrbios que envolvem alterações nas redes endocíticas e de actina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CIP4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIP10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIP10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIP10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CIP4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIP10 para a investigação da sinalização de CIP4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIP10 críticos para a função CIP4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIP10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CIP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CIP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIP10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CIP4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CIP4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIP10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIP10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.