CIP4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406095

Descripción general

TRIP10 codifica la proteína 4 que interactúa con Cdc42 (CIP4), un adaptador con dominios F-BAR/SH3 que conecta la detección de la curvatura de la membrana con la remodelación del citoesqueleto de actina. CIP4 coopera con Cdc42, dinamina y N-WASP para coordinar la endocitosis mediada por clatrina, el tráfico vesicular y el ensamblaje de actina cortical, influyendo así en la internalización de receptores y la atenuación de señales. A través de estas funciones, CIP4 contribuye a procesos como la polaridad celular, la migración y la dinámica de protrusiones tipo invadopodios, vinculándose con vías que regulan la organización del citoesqueleto y la remodelación de membranas. La actividad desregulada de TRIP10/CIP4 se ha estudiado en el contexto de la motilidad celular aberrante y de programas de señalización relevantes para la biología del cáncer y otros trastornos que implican redes endocíticas y de actina alteradas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CIP4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRIP10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRIP10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRIP10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CIP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRIP10 para la investigación de la señalización de CIP4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRIP10 críticos para la función de CIP4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRIP10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CIP4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CIP4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRIP10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CIP4 (h) y el plásmido HDR CIP4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRIP10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRIP10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.