Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CHMP1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406556
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- CHMP1A Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im CHMP1A-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CHMP1A: sc-271617
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CHMP1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-406556 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
CHMP1A (charged multivesicular body protein 1A) ist ein zentraler Bestandteil der ESCRT‑III‑Maschinerie, die Membranen umformt und dadurch die Biogenese multivesikulärer Körper sowie die Sortierung endosomaler Fracht in Richtung lysosomaler Degradation antreibt. Über ESCRT‑abhängige Prozesse trägt CHMP1A zur Herunterregulierung von Rezeptoren, zu Membranabschnürungsereignissen und zur übergeordneten Regulation der Proteostase, der Zytokinese und der Dynamik der Kernhülle bei. Störungen des mit CHMP1A assoziierten endolysosomalen Transports können die Dauer von Signalwegaktivierung und die zelluläre Homöostase verändern und verknüpfen ESCRT‑Dysfunktion mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen sowie anderen Erkrankungen, die durch gestörten Membrantransport gekennzeichnet sind. Als menschliches Gen wird CHMP1A häufig in Kontexten untersucht, in denen Endosomenreifung und die Kontrolle vesikelvermittelter Signalübertragung für krankheitsrelevante zelluläre Zustände zentral sind.
Das CHMP1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CHMP1A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CHMP1A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CHMP1A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CHMP1A-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CHMP1A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CHMP1A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf CHMP1A-Exone abzielen, die für die CHMP1A-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere CHMP1A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom CHMP1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CHMP1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CHMP1A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CHMP1A HDR-Plasmid (h) und CHMP1A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CHMP1A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CHMP1A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.