Chk2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424521

개요

Chek2는 DNA 이중가닥 절단에 대한 반응으로 ATM의 하위에서 활성화되는 세린/트레오닌 키나아제인 체크포인트 키나아제 Chk2를 암호화합니다. Chk2는 인산화되면 p53 및 CDC25 포스파테이스와 같은 효과기들을 조절함으로써 DNA 손상 신호전달을 확산시키며, 그 결과 세포주기 체크포인트 조절, DNA 복구 경로 선택, 세포 노화, 아폽토시스에 영향을 미칩니다. 마우스 시스템에서는 Chek2 활성은 유전체 안정성, 복제 스트레스, 산화적 손상 반응을 다루는 연구에서 흔히 분석됩니다. CHEK2/Chk2 신호전달의 조절 이상은 암과 관련된 DNA 손상 반응 결함과 광범위하게 연관되며, 실험 모델에서 유전독성 스트레스에 대한 민감도를 변화시킬 수 있습니다.

Chk2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Chek2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Chek2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Chek2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Chk2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Chk2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Chek2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Chk2 기능에 중요한 Chek2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Chek2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Chk2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Chk2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Chek2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Chk2 HDR 플라스미드 (m) 및 Chk2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Chek2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Chek2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.