Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CFTR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400653-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CFTRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CFTR (h) e o Plasmídeo Double Nickase CFTR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CFTR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CFTR Anticorpo (A-3): sc-376683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CFTR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400653-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CFTR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400653-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CFTR codifica o regulador de condutância transmembrana da fibrose cística, um canal iónico da família ABC, dependente de ATP e regulado por cAMP/PKA, que transporta cloreto e bicarbonato através de membranas epiteliais. A atividade do CFTR coordena a secreção de fluidos transepitelial, a hidratação da superfície das vias aéreas e a depuração mucociliar, e integra-se em redes de transporte iónico que envolvem ENaC e permutadores SLC26 para manter o equilíbrio eletrolítico do epitélio. A perturbação do transporte dependente de CFTR altera a homeostase epitelial e a sinalização inflamatória em tecidos como as vias aéreas, o pâncreas e o intestino. A variação genética em CFTR está fortemente associada à fibrose cística e contribui para um conjunto mais amplo de doenças relacionadas com CFTR, tornando-o um alvo central para estudos mecanísticos da fisiologia epitelial e da regulação de canais.
CFTR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CFTR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CFTR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CFTR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CFTR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.