CETP Double Nickase Plasmid (h): sc-405829-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CETP Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CETP Double-Nickase-Plasmid (h) und CETP Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CETP abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CETP Double Nickase Plasmid (h) | sc-405829-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CETP Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405829-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Cholesterylester-Transferprotein (CETP) ist ein sezerniertes Glykoprotein, das den Austausch von Cholesterylestern und Triglyceriden zwischen HDL und apoB-haltigen Lipoproteinen vermittelt und damit die Zusammensetzung der Plasma-Lipoproteine sowie den reversen Cholesterintransport prägt. Durch die Regulation des HDL-Remodelings und des Lipidflusses beeinflusst CETP die Cholesterinhomöostase, hepatische Aufnahmepfade und nachgeschaltete Entzündungsreaktionen, die mit metabolischem Stress in Verbindung stehen. Genetische Variation oder eine veränderte CETP-Expression wurde mit Veränderungen der HDL-C-Spiegel und der Verteilung von Lipoproteinpartikeln assoziiert, wodurch die CETP-Biologie mit kardiometabolischen Phänotypen und atherosklerosebezogenen Mechanismen verknüpft ist. Diese Eigenschaften machen CETP zu einem nützlichen Ziel, um Lipidtransportnetzwerke und lipoproteinvermittelte Signalwege in menschlichen Zell- und Gewebemodellen zu untersuchen.
CETP Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CETP-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CETP abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CETP-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CETP-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.