CEP152 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430248

Descripción general

Cep152 codifica la proteína centrosomal CEP152, un andamiaje central necesario para la biogénesis de los centríolos y la duplicación del centrosoma en células de ratón. CEP152 coopera con PLK4 y otros factores de ensamblaje de centríolos para reclutar y organizar el material pericentriolar, lo que favorece la nucleación de microtúbulos y la formación correcta de un huso bipolar durante la mitosis. La alteración de CEP152 perturba la progresión del ciclo celular, desencadena la amplificación o la pérdida de centrosomas y promueve la inestabilidad genómica debido a defectos en el ensamblaje del huso y en la segregación cromosómica. Estos procesos vinculan a CEP152 con vías que se investigan con frecuencia en biología del desarrollo, neurogénesis y mecanismos relevantes en cáncer relacionados con la fidelidad mitótica y las respuestas al daño del ADN.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CEP152 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cep152 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cep152 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cep152 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CEP152.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cep152 para la investigación de la señalización de CEP152, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cep152 críticos para la función de CEP152
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cep152 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CEP152 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CEP152 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cep152. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CEP152 (m) y el plásmido HDR CEP152 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cep152 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cep152 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.