CEACAM7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406726

Descripción general

CEACAM7 (molécula 7 de adhesión celular relacionada con el antígeno carcinoembrionario) es un miembro de la superfamilia de las inmunoglobulinas anclado a GPI, implicado en la adhesión célula–célula homofílica y heterofílica en superficies epiteliales. A través de interacciones que influyen en la organización de la membrana y en la señalización dependiente del contacto, CEACAM7 contribuye a la diferenciación epitelial, la polaridad y los procesos asociados a la función de barrera en tejidos mucosos. La expresión alterada de CEACAM7 se ha asociado con la remodelación epitelial y con cambios ligados al tumor en los programas de adhesión y diferenciación, lo que la convierte en un nodo molecular útil para estudiar mecanismos que conectan la adhesión celular con el control del crecimiento. En biología del cáncer y en la investigación del epitelio mucoso, CEACAM7 se evalúa con frecuencia junto con otros miembros relacionados de la familia CEACAM para entender la compensación de vías y los fenotipos impulsados por la adhesión.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CEACAM7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CEACAM7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CEACAM7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CEACAM7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CEACAM7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CEACAM7 para la investigación de la señalización de CEACAM7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CEACAM7 críticos para la función de CEACAM7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CEACAM7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CEACAM7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CEACAM7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CEACAM7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CEACAM7 (h) y el plásmido HDR CEACAM7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CEACAM7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CEACAM7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.