Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Cdx2: sc-401220-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Cdx2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cdx2 Double Nickase (h) et le plasmide Cdx2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDX2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdx2 Antibody (E-1): sc-393572
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Cdx2 | sc-401220-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Cdx2 | sc-401220-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDX2 code le facteur de transcription à homéoboîte de type caudal Cdx2, un régulateur déterminant de lignée indispensable à la spécification du trophectoderme et à la différenciation de l’épithélium intestinal. Cdx2 se fixe à des éléments promoteurs/activateurs riches en AT afin de contrôler des programmes géniques régissant la polarité cellulaire, la prolifération et la maturation, en s’intégrant aux réseaux transcriptionnels associés aux voies Wnt/β-caténine, BMP et Notch au cours du développement intestinal et de l’homéostasie. Une expression dérégulée de CDX2 est couramment utilisée comme caractéristique moléculaire dans les contextes gastro-intestinaux et autres tissus épithéliaux, où des états de différenciation altérés et une plasticité de lignée sont liés à la biologie tumorale et à un remodelage muqueux aberrant. En tant que régulateur transcriptionnel nucléaire, Cdx2 constitue un nœud accessible pour étudier le contrôle de l’identité épithéliale dépendant de la chromatine et la reprogrammation adaptative au stress.
Cdx2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDX2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.